UNIVERSIDAD DE MÁLAGA. FACULTAD DE CIENCIAS.

Titulo del proyecto: Visualización de la patología cerebral de modelos animales transgénicos de Alzheimer mediante microscopía de epifluorescencia y láser confocal Nombre del Investigador: Antonia Gutiérrez ([email protected]), José Carlos Dávila ([email protected]) y Raquel Sánchez ([email protected]) Departamento del Investigador: DPTO. BIOLOGÍA CELULAR, GENÉTICA Y FISIOLOGÍA. ÁREA DE BIOLOGÍA CELULAR.

Número de Alumnos: 6 Nivel educativo del alumnado: 4 ESO/1º Bachillerato Necesidad de conocimientos y aptitudes previas del alumnado: Conocimientos básicos de Biología: genes, proteínas, células eucariotas, neurona, glía Número de sesiones voluntarias en horario de tarde: Ninguna Hipótesis científica que se plantea en la investigación: la acumulación extracelular de proteína beta-amiloide (placas amiloides) induce una respuesta glial Breve descripción del proyecto: Se analizarán las lesiones proteicas más características en el cerebro de los pacientes de Alzheimer, los depósitos de beta-amiloide (placas amiloides), en secciones de cerebro de ratones transgénicos que portan genes humanos con mutaciones del Alzheimer familiar. Los depósitos se visualizarán mediante marcaje con Tioflavina-S al microscopio de epifluorescencia. Las células gliales se marcarán mediante inmunotinción con anticuerpos específicos acoplados a fluorocromos. El doble marcaje placa/glia se visualizará al microscopio láser confocal. Para ellos se propone el siguiente plan experimental: Sesión 1. (3-4 horas). Introducción de los modelos animales transgénicos de Alzheimer y su uso en la investigación biomédica. Proceso histológico de muestras de cerebro y obtención de secciones en el microtomo. Sesión 2. (3-4 horas). Técnicas básicas de tinción histológica y técnicas inmunohistoquímicas para el marcaje de moléculas/células específicas. Observación de las secciones teñidas con Tioflavina-S en el microscopio de epifluorescencia para visualizar las placas amiloides en distintas regiones cerebrales. Obtención de imágenes microscópicas y análisis de los resultados. Sesión 3. (3-4 horas). Realización de marcaje simple o doble inmunofluorescente y observación de las preparaciones al microscopio láser confocal. Obtención de imágenes microscópicas y análisis de resultados.

Metodología e instrumentación básica: Obtención cortes histológicos. Tinción con Tioflavina-S. Marcaje inmunofluorescente. Preparación de soluciones. Montaje de secciones sobre portaobjetos. Microscopio de epifluorescencia y microscopio láser confocal. Análisis de imagen mediante softwares especializados.

Links de interés http://webdeptos.uma.es/biocel/NeuroAD.htm http://www.uma.es/departamento-de-biologia-celular-genetica-yfisiologia/info/71532/alzheimer/?set_language=en http://www.alz.org/espanol/about/que_es_la_enfermedad_de_alzheimer.asp